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IVD
SIGNIFICATION CLINIQUE
L’urée est une molécule résultant du processus de catabolisme des protéines, éliminée par les reins
sous forme de déchets azotés.
La détermination du taux de l’urée permet donc d’évaluer la fonction rénale, plus particulièrement
chez les personnes diabétiques et les patients ayant subi un infarctus du myocarde. Dans le cas de
dysfonctionnement rénal, il y a une augmentation de l’urémie. De plus, certaines pathologies du foie
peuvent également altérer le taux d’urée dans le sang.
Le dosage de l’urée seule n’est pas très informatif, étant donné que l’urée produite chaque jour
varie en fonction de l’alimentation, de l’âge et de l’état d’hydratation. De ce fait, les dosages de la
créatinine et d’acide urique sont généralement effectués en même temps. En outre, la détermination
de la clairance de l’urée permet d’évaluer la vitesse de filtration des reins, et l’efficacité de la dialyse.
PRINCIPE
Méthode enzymatique basée sur le principe de réaction décrit par Talke et Schubert :
La diminution de l’absorbance suite à la conversion du NADH en NAD+ à 340 nm est proportionnelle
à la concentration en urée dans l’échantillon.
Uréase
Urée + H
2
2NH
3
+ CO
2
2NH
4
+
+ Oxo-2-glutarate + NADH
GLDH
Glutamate + NAD
+
+ 2H
2
O
GLDH : Glutamate deshydrogénase
COMPOSITION DES REACTIFS
Réactif 1
Solution tampon
Tampon Tris pH 8 80 mmol/l
Réactif 2
Enzymes
Uréase
GLDH
NADH
Oxo-2-glutarate
>10 000U/l
16 000 U/l
0.30 mmol/l
15 mmol/l
Réactif 3
Standard
Standard Urée
50 mg/dl
8.325 mmol/l
PRECAUTIONS
Les réactifs Biomaghreb sont destinés à du personnel qualifié, pour un usage in vitro (ne pas pipeter
avec la bouche).
• Consulter la FDS en vigueur disponible sur demande ou sur www.biomaghreb.com;
• Vérifier l’intégrité des réactifs avant leur utilisation ; et
• Elimination des déchets : respecter la législation en vigueur.
Par mesure de sécurité, traiter tout spécimen ou réactif d’origine biologique comme potentiellement
infectieux. Respecter la législation en vigueur.
PREPARATION DES REACTIFS
Solution de travail :
Dissoudre un flacon de R2 dans un flacon de R1.
PREPARATION DES ECHANTILLONS
Sérum, plasma recueillis sur héparine. Urine diluée au 1/100 avec de l’eau distillée.
CONSERVATION ET STABILITE
• Avant ouverture : Jusqu’à la date de péremption indiquée sur l’étiquette du coffret à 2-8°C;
• Après ouverture : (Solution de travail) :
5 jours à 20 -25°C ;
3 semaines à 2-8°C.
MATERIEL COMPLEMENTAIRES
• Equipement de base du laboratoire d’analyses médicales ;
• Spectrophotomètre ou Analyseur de biochimie clinique.
LIMITES
Ne pas utiliser d’anticoagulant contenant des ions fluorures ou ammonium.
CONTROLE DE QUALITE
Programme externe de contrôle de la qualité.
Il est recommandé de contrôler dans les cas suivants:
• Au moins un contrôle par série.
• Changement de flacon de réactif.
• Après opérations de maintenance sur l’analyseur.
Lorsqu’une valeur de contrôle se trouve en dehors des limites de confiance, répéter l’opération en
utilisant le même contrôle.
Utiliser des sérums de contrôle normaux et pathologiques.
CALIBRATION
Etalon du coffret (Réactif 3) ou tout calibrant raccordé sur une méthode ou un matériau de réfé-
rence.
La fréquence de calibration dépend des performances de l’analyseur et des conditions de conser-
vation du réactif.
Il est recommandé de calibrer à nouveau dans les cas suivants:
1. changement du lot de réactif ;
2. après opérations de maintenance sur l’analyseur ; et
3. les valeurs de contrôle sortent des limites de confiance.
LINEARITE
La méthode est linéaire jusqu’à 2 g/l (200 mg/dl - 33.3 mmol/l).
MODE OPERATOIRE
Longueur d’onde: 340 nm ;
Température : 25-30-37°C ;
Cuve: 1 cm d’épaisseur ;
Ajuster le zéro du spectrophotomètre sur l’air ou l’eau distillée.
Standard Dosage
Solution de travail
1 ml 1 ml
Préincuber à la température choisie 25, 30, 37°C.
Réactif 3
10 µl --
Solution de travail
-- 10 µl
Mélanger, mesurer la diminution de DO entre :
t = 20 secondes et t = 80 secondes.
CALCUL
Urée =
Δ DO échtantillon
Δ DO Standard
x n
n = Valeur du standard
n = 50 mg/dl;
n = 0, 5 g/l;
n = 8,325 mmol/l.
VALEURS DE REFERENCE
Sérum ou
plasma
15 - 40 mg/dl
0,15 – 0,40 g/l
2,49 – 6,66 mmol/l
Urine 20 - 35 g/24 h
REFERENCES
Talke H, Schubert GE 1965. Klin Wochenschr 43:174-5 ;
Chaney, A. Clin. 8, 130 (1962) ;
Fawcett J.K., J. Clin. Path.13, 15 (1960).
UREE U.V
Méthode cinétique
Réactif pour le dosage quantitatif de l’urée
dans le plasma humain et les urines.
USAGE IN VITRO
FT Fr 29 Date de MAJ : 10/ 2020 Version B
Fabricant Date de
péremption
Usage “In vitro” Température
de conservation
Référence Produit Consulter la notice Conserver à l’abri
de la lumière
Sufsant
pour < n > essais
Numéro de lot
