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IVD
PRINCIPE
Les streptocoques ß hémolytiques des groupes A, C, G secrètent une enzyme: la streptolysine “O”
présentant une activité hémolytique sous sa forme réduite. Cette streptolysine “O” provoque la for-
mation dans l’organisme d’anticorps ASO révélés par une réaction de neutralisation de l’activité hé-
molytique de cette enzyme vis-à-vis de globules rouges de lapin.
COMPOSITION DES REACTIFS
- Lyophilisat de streptolysine
- Tampon streptolysine sous forme 10 fois concentré : Il est à diluer pour l’emploi : 1 partie de
tampon pour 9 parties d’eau distillée, en cas de cristallisation, rechauffer à 37°C pour remettre les
cristaux en solution.
On utilise classiquement une suspension d’hématie de lapin à 1 % dans le tampon streptolysine 1x.
Toutefois le titre élevé de la streptolysine utilisée permet d’obtenir des résultats identiques avec des
hématies humaines du groupe O très soigneusement lavées : 3 lavages en eau physiologique. Le
dernier culot est repris dans le tampon streptolysine 1x.
Reconstitution de la Streptolysine titrée : enfoncer une aiguille creuse à travers le bouchon de
caoutchouc de manière à remplir d’air le flacon sans risquer de perdre une partie de lyophilisat.
Décapsuler et déboucher le flacon pour y introduire exactement 8 ml de solution isotonique tam-
ponnée. Reboucher et favoriser la mise en solution par une agitation modérée. La streptolysine est
alors sous sa forme active.
PRECAUTIONS
Les réactifs Biomaghreb sont destinés à du personnel qualifié, pour un usage in vitro (ne pas pipeter
avec la bouche).
• Consulter la FDS en vigueur disponible sur demande ou sur www.biomaghreb.com;
• Vérifier l’intégrité des réactifs avant leur utilisation ; et
• Elimination des déchets : respecter la législation en vigueur.
Par mesure de sécurité, traiter tout spécimen ou réactif d’origine biologique comme potentiellement
infectieux. Respecter la législation en vigueur.
MACROMETHODES ECHANTILLONS
- Les sérums à examiner ne doivent pas présenter d’hémolyse. Ils doivent être inactivés par chauf-
fage à 56°C pendant 30 minutes (Dans le cas où l’on utilise des sérums inactivés depuis plus de 24
heures, il est recommandé de les placer à nouveau au bain-marie à 56°C pendant 10 minutes.
CONSERVATION
- Lyophilisée : notre streptolysine se conserve environ 3 ans à + 4° C.
- Reconstituée: elle doit être utilisée dans les 5 heures.
MODE OPERATOIRE (Voir Tableau 1)
Dilutions-mères :
Dans 2 tubes à hémolyse A et B, introduire 2 ml de solution isotonique tamponnée, Ajouter 0,5 ml
de sérum à étudier dans le tube A (dilution réalisée 1/5). Mélanger et reporter 1 ml du tube A dans le
tube B (dilution réalisée 1/15).
Préparation des dilutions de titrage des sérums à examiner.
Pour chaque sérum, préparer 2 séries de tubes numérotés 1-2-4-6-8-10 pour la dilution-mère A de
sérum (au 1/5) et 3-5-7-9 pour la dilution-mère B de sérum (au 1/15) et deux tubes 11 et 12 pour les
témoins hématies et streptolysine.
Procéder suivant le tableau 1 en progression géométrique. Répartir les volumes indiqués en ml.
Tableau 1 :
Les taux normaux obtenus sont inférieurs à 200 U.A.S. Un chiffre de
200 unités ou au-dessus doit être considéré comme pathologique.
MICROMETHODE
Préparer les dilutions des sérums à tester (Voir Tableau 2) :
- Dilution 1/5 : 0,1 ml de sérum + 0,4 ml de tampon
- Dilution 1/15 : 0,1 ml de sérum + 1,4 ml de tampon
Répartir sur microplaque (en ml)
Tableau 2 : MICROMETHODE
Les taux normaux obtenus sont inférieurs à 100 UAS. Un chiffre de 200
unités ou au dessus doit être considéré comme pathologique.
USAGE IN VITRO
FT Fr 44 Date de MAJ : 10/ 2020 Version B
Fabricant Date de
péremption
Usage “In vitro” Température
de conservation
Référence Produit Consulter la notice Conserver à l’abri
de la lumière
Sufsant
pour < n > essais
Numéro de lot
STREPTOLYSINE ETALONNEE
Dosage des antistreptolysines
