6, Rue Ibn Ennafis - Z.I. Lac 3 Tunisie
Tél. : 71 182 500 - Fax : 71 182 250
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IVD
SIGNIFICATION CLINIQUE
Les protéines sont des composés organiques macromoléculaires, largement répandues dans l’orga-
nisme. Elles fonctionnent comme des éléments de structure ou des molécules de transport. La déter-
mination de leur taux est nécessaire pour déceler une hyperprotéinémie produite par hémoconcentra-
tion, une déshydratation ou une augmentation de la concentration des protéines spécifiques. L’hypo
protéinémie par hémodilution peut être due à un dysfonctionnement dans la synthèse protéique, à
des pertes excessives (hémorragies) ou à un catabolisme protéique important.
PRINCIPE
Méthode colorimétrique décrite par Gornall et al (1949). Les liaisons peptidiques des proteines réa-
gissent avec le Cu2+ en solution alcaline pour former un complexe bleu-violet dont l’absorbance est
proprtionnelle à la concentration de protéines. Le réactif Biuret contient du sodium potassium tartrate
qui complexe les ions cuivre et maintient leur solubilité dans le milieu alcalin.
COMPOSITION DES REACTIFS
Réactif 1
Réactif
alcalin
Tartrate de Sodium Potassium
Hydroxyde de sodium
lodure de potassium
31, 9 mmol/l
0,6 mol/l
30 mmol/l
Réactif 2
Réactif de
coloration
Sulfate de cuivre (NOCIF) 0,6 mol/l
Réactif 3
Standard
Albumine bovine
50 g/l
5 g/dl
PRECAUTIONS
Les réactifs Biomaghreb sont destinés à du personnel qualifié, pour un usage in vitro (ne pas pipeter
avec la bouche).
• Consulter la FDS en vigueur disponible sur demande ou sur www.biomaghreb.com;
• Vérifier l’intégrité des réactifs avant leur utilisation ; et
• Elimination des déchets : respecter la législation en vigueur.
Par mesure de sécurité, traiter tout spécimen ou réactif d’origine biologique comme potentiellement
infectieux. Respecter la législation en vigueur.
PREPARATION DES REACTIFS
Solution de travail :
Ajouter 3 ml de R2 à 1 flacon R1
REF
(27016) et
REF
(27023).
PREPARATION DES ECHANTILLONS
Sérum ou plasma hepariné.
CONSERVATION ET STABILITE
• Avant ouverture : Jusqu’à la date de péremption indiquée sur l’étiquette du coffret à 2-8°C;
• Après ouverture : (Solution de travail) :
6 mois à 2-8°C.
MATERIEL COMPLEMENTAIRES
• Equipement de base du laboratoire d’analyses médicales ;
• Spectrophotomètre ou Analyseur de biochimie clinique.
CONTROLE DE QUALITE
Programme externe de contrôle de la qualité.
Il est recommandé de contrôler dans les cas suivants:
• Au moins un contrôle par série.
• Changement de flacon de réactif.
• Après opérations de maintenance sur l’analyseur.
Lorsqu’une valeur de contrôle se trouve en dehors des limites de confiance, répéter l’opération en
utilisant le même contrôle.
Utiliser des sérums de contrôle normaux et pathologiques.
CALIBRATION
Etalon du coffret (Réactif 3) ou tout calibrant raccordé sur une méthode ou un matériau de réfé-
rence.
La fréquence de calibration dépend des performances de l’analyseur et des conditions de conser-
vation du réactif.
Il est recommandé de calibrer à nouveau dans les cas suivants:
1. changement du lot de réactif ;
2. après opérations de maintenance sur l’analyseur ;
3. les valeurs de contrôle sortent des limites de confiance.
LINEARITE
La méthode est linéaire jusqu’à 150 g/l.
MODE OPERATOIRE
Longueur d’onde: 546 nm ;
Température ambiante ;
Cuve: 1 cm d’épaisseur ;
Ajuster le zéro du spectrophotomètre par le blanc réactif.
Blanc Standard Echantillon
Standard
- - 20 µl - -
Echantillon
- - - - 20 µl
Solution de travail
1 ml 1 ml 1 ml
Mélanger et lire les les absorbances après une incubation de 5 minutes à
température ambiante. La stabilité de la coloration est de 30 minutes.
CALCUL
Protéines totales =
DO échtantillon
DO Standard
x n
n = Valeur du standard
n = 50 g/l ;
n = 5 g/dl.
VALEURS DE REFERENCE
Nouveau-nés
52 - 91 g/l
5,2 - 9,1 g/dl
Enfants
54 - 87 g/l
5,4 - 8,7 g/dl
Adultes
67 - 87 g/l
6,7 - 8,7 g/dl
REFERENCES
A. Gornall et al- J. Biol-Chem 177,751 (1949) ;
Henry R.J., Annal. Chem. 92, 1491 (1957) ;
Peter T.J. Clin. Chem. 14, 1147 (1968) ;
T.E. Weichselbaum: Am. J. Clin. Pathol. 16 Sect. 10-40 (1946).
PROTEINES TOTALES
Méthode colorimétrique au Biuret
Réactif pour le dosage quantitatif des
protéines totales dans le sérum humain
USAGE IN VITRO
FT Fr 26 Date de MAJ : 10/ 2020 Version B
Fabricant Date de
péremption
Usage “In vitro” Température
de conservation
Référence Produit Consulter la notice Conserver à l’abri
de la lumière
Sufsant
pour < n > essais
Numéro de lot
