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IVD
SIGNIFICATION CLINIQUE
Les phosphatases alcalines (PAL) sont des enzymes localisées dans la plupart des tissus de l’orga-
nisme, particulièrement dans les os, le foie, l’intestin, les reins, et le placenta. Environ 80% de l’ac-
tivité PAL circulante provient des iso formes d’origine hépatique et osseuse. Le dosage de l’activité
des PAL est souvent prescrit en cas de suspicion de maladie du foie ou des os. Une augmentation
de l’activité PAL est constatée lors d’une cholestase ou des obstructions biliaires, ou bien dans le
cadre de pathologies osseuses telles que le rachitisme, la maladie de Paget, l’ostéomalacie, et les
métastases osseuses.
PRINCIPE
Il s’agit de la détermination cinétique de l’activité phosphatase alcaline (PAL) selon la méthode re-
commandée par la société allemande de chimie clinique (DGKG).
En milieu alcalin, les phosphatases alcalines catalysent l’hydrolyse du Nitrophénylphosphate en Ni-
trophénol et en phosphate.
La cinétique de formation du nitrophénol est proportionnelle à l’activité PAL dans l’échantillon.
COMPOSITION DES REACTIFS
Réactif 1
Solution tampon
Tampon diéthanolamine pH
9,8 Chlorure de magnésium
1 mmol/l
0,5 mmol/l
Réactif 2
Substrat
Nitrophénylphosphate 10 mmol/l
PRECAUTIONS
Les réactifs Biomaghreb sont destinés à du personnel qualifié, pour un usage in vitro (ne pas pipeter
avec la bouche).
• Consulter la FDS en vigueur disponible sur demande ou sur www.biomaghreb.com
• Vérifier l’intégrité des réactifs avant leur utilisation.
• Elimination des déchets : respecter la législation en vigueur.
Par mesure de sécurité, traiter tout échantillon ou réactif d’origine biologique comme potentiellement
infectieux. Respecter la législation en vigueur.
PREPARATION DES REACTIFS
Solution de travail :
Reprendre le flacon R1 par la quantité de R2 nécessaire, indiquée ci-dessous :
REF
13019 et
REF
13040 : R1...................................... 3 ml
R2....................................0,3 ml
REF
13026 : R1.....................................10 ml
R2.......................................1 ml
REF
13033 : R1.....................................50 ml
R2.......................................5 ml
PREPARATION DES ECHANTILLONS
Sérum ou plasma hépariné sans hémolyse.
CONSERVATION ET STABILITE
• Avant ouverture : Jusqu’à la date de péremption indiquée sur l’étiquette du coffret à 2-8°C;
• Après ouverture : (Solution de travail) :
5 jours à 15 -25°C;
15 jours à 2-8°C.
MATERIEL COMPLEMENTAIRES
• Equipement de base du laboratoire d’analyses médicales ;
• Spectrophotomètre ou Analyseur de biochimie clinique.
CONTROLE DE QUALITE
Programme externe de contrôle de la qualité.
Il est recommandé de contrôler dans les cas suivants:
• Au moins un contrôle par série ;
• Changement de flacon de réactif ;
• Après opérations de maintenance sur l’analyseur.
Lorsqu’une valeur de contrôle se trouve en dehors des limites de confiance, répéter l’opération en
utilisant le même contrôle.
Utiliser des sérums de contrôle normaux et pathologiques.
LINEARITE
Si la variation moyenne de D.O/min > 0,250 refaire le test en diluant l’échantillon au 1/5 dans une
solution de NaCl à 9g/l et multiplier le résultat par 5.
MODE OPERATOIRE
Longueur d’onde : 405 nm ;
Température : 25- 30 ou- 37°C ;
Cuve : 1 cm d’épaisseur ;
Ajuster le zéro du spectrophotomètre sur l’air ou l’eau distillée.
Solution de travail
1 ml
Equilibrer à 25 - 30 ou 37°C
Echantillon
20 µl
Mélanger et introduire dans une cuve thermostatée.
Attendre 1 minute puis mesurer l’augmentation moyenne de la densité optique par minute
pendant 1 à 3 minutes.
Remarque : La mesure de l’activité enzymatique est meilleure dans les quatre heures qui suivent le
prélèvement.
CALCUL
A 405 nm ...............PAL (UI/L) = ΔD.O/min x 2750;
A 410 nm ...............PAL (UI/L) = ΔD.O/min x 2910.
VALEURS DE REFERENCE
25°C 30°C 37°C
Enfants
400 UI/l 500 UI/l 650 UI/l
Adultes
40 -190 UI/l 50 - 230 UI/l 70 - 300 UI/l
REFERENCES
Haussamen T.U. et al. Clin. Chim. Acta. 35, 271-273 (1977).
PHOSPHATASE ALCALINE
Méthode DGKG
Détermination cinétique de l’activité phosphatase alcaline (EC 3.1.3.1)
USAGE IN VITRO
FT Fr 14 Date de MAJ : 10/2020 Version B
Fabricant Date de
péremption
Usage “In vitro” Température
de conservation
Référence Produit Consulter la notice Conserver à l’abri
de la lumière
Sufsant
pour < n > essais
Numéro de lot
