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IVD
SIGNIFICATION CLINIQUE
L’ASAT (l’aspartate amino-transferase) autrefois appelée Glutamate Oxaloacétique Transaminase
(GOT), est une enzyme localisée majoritairement dans les cellules cardiaques, hépatiques, et en
moindre proportion, dans les cellules musculaires. Lorsque ces cellules sont altérées, elles libèrent
l’enzyme dans le sang. Le dosage de l’activité ASAT est donc effectué dans le cadre d’un bilan hépa-
tique, chez des patients atteints d’hépatite virale, de nécrose hépatique ou de cirrhose ; ou de nécrose
cardiaque (à la suite d’un infarctus du myocarde). Son résultat est généralement interprété avec
ceux de la phosphatase alcaline (PAL), et de l’Alanine Amino-transférase (ALAT). Dans certains cas,
l’activité ASAT augmente lors de dystrophie musculaire ou de pancréatite aigüe.
PRINCIPE
La réaction est initiée par addition de l’échantillon au réactif selon le schéma réactionnel suivant :
GOT
2 oxoglutarate + L-Aspartate Glutamate + oxaloacetate
MDH
Oxaloacetate + NADH + H
+
Malate + NAD
+
Le taux de diminution de la concentration en NADH est directement proportionnel à l’activité aspar-
tate amino-transférase dans l’échantillon.
MDH: Malate Déshydrogénase
COMPOSITION DES REACTIFS
Réactif 1
Solution tampon
Tampon Tris pH 7.8 à 30°C
L- aspartate
80 mmol/l
200 mmol/l
Réactif 2
Substrat
NADH
LDH
MDH
Oxoglutarate
0,18 mmo/l
800 UI/l
600 UI/l
12 mmol/l
PRECAUTIONS
Les réactifs Biomaghreb sont destinés à du personnel qualifié, pour un usage in vitro (ne pas pipeter
avec la bouche).
• Consulter la FDS en vigueur disponible sur demande ou sur www.biomaghreb.com
• Vérifier l’intégrité des réactifs avant leur utilisation.
• Elimination des déchets : respecter la législation en vigueur.
Par mesure de sécurité, traiter tout échantillon ou réactif d’origine biologique comme potentiellement
infectieux. Respecter la législation en vigueur.
PREPARATION DES REACTIFS
Reprendre le substrat par 3 ml
REF
(10018) et
REF
(10032) ou 10 ml
REF
(10025) de Tampon R1.
Pour
REF
(10049) reconstituer chaque R2 par un flacon R1.
PREPARATION DES ECHANTILLONS
Sérum ou plasma hépariné sans hémolyse.
CONSERVATION ET STABILITE
Stockés à l’abri de la lumière, dans le flacon d’origine bien bouché à 2-8°C, les réactifs sont stables,
s’ils sont utilisés et conservés dans les conditions préconisées :
• Avant ouverture : Jusqu’à la date de péremption indiquée sur l’étiquette du coffret à +4°C ;
• Après ouverture : (Solution de travail) :
24 heures à 20 -25°C;
7 jours à 2-8°C.
MATERIEL COMPLEMENTAIRES
• Equipement de base du laboratoire d’analyses médicales ;
• Spectrophotomètre ou Analyseur de biochimie clinique.
LIMITES
L’hémolyse peut interférer.
CONTROLE DE QUALITE
Programme externe de contrôle de la qualité.
Il est recommandé de contrôler dans les cas suivants:
• Au moins un contrôle par série.
• Changement de flacon de réactif.
• Après opérations de maintenance sur l’analyseur.
Lorsqu’une valeur de contrôle se trouve en dehors des limites de confiance, répéter l’opération en
utilisant le même contrôle.
Utiliser des sérums de contrôle normaux et pathologiques.
LINEARITE
Si la ΔDO/min à 340 nm est supérieure à 0,15, répéter le test en diluant l’échantillon au 1/10 avec
une solution de NaCl à 9 g/l.
Multiplier le résultat par 10.
MODE OPERATOIRE
Longueur d’onde : 340 nm ;
Température : 25 – 30 ou 37°C ;
Cuve : 1 cm d’épaisseur ;
Ajuster le zéro du spectrophotomètre sur l’air ou l’eau distillée.
Solution de travail
1 ml 3 ml
Préincuber à la température choisie (25, 30 ou 37°C)
Echantillon
100 µl 300 µl
Mélanger et incuber 1 minute.
Mesurer la diminution de la densité optique par minute pendant 1 à 3 minutes.
CALCUL
Δ DO / min x 1750 = UI/l.
VALEURS DE REFERENCE
25°C 30°C 37°C
Femmes
Jusqu’à 16 Ul/l Jusqu’à 22 Ul/l Jusqu’à 31UI/l
Hommes
Jusqu’à 19UI/l Jusqu’à 26 Ul/l Jusqu’à 38UI/l
REFERENCES
Bergmeyer H; Bower and Cols. Clin. Chim Acta 70, (1976) ;
Bergmeyer H et Wahiegeld Clin. Chem 24, 58 (1978) ;
IFCC, Méthod for L-Aspartate aminotransferase, J Clin Chem. Clou Biachem (1986) 24. P497-510.
GOT - ASAT
Méthode cinétique IFCC sans phosphate de pyridoxal
Détermination quantitative de l’activité de l’aspartate amino-transferase
(EC 2.3.2.2) dans le sérum et le plasma humains
USAGE IN VITRO
FT Fr 11 Date de MAJ : 10/ 2020 Version B
Fabricant Date de
péremption
Usage “In vitro” Température
de conservation
Référence Produit Consulter la notice Conserver à l’abri
de la lumière
Sufsant
pour < n > essais
Numéro de lot
