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USAGE IN VITRO
FT Fr 33 Date de MAJ : 10/2020 Version B
FIBRINOGENE
SIGNIFICATION CLINIQUE
Le fibrinogène ( facteur I), proteine synthétisée dans le foie, est un composant du sang nécessaire
pour former le caillot. Sa détermination nous aide à évaluer les altérations dans les mécanismes de la
coagulation. La concentration augmente au cours des inflammations aigues et lors de la grossesse ; au
contraire on observe une diminution dans le cas de thérapies thrombolytiques,des maladies hépatiques
(cirrhose, ictère…) ou des cas de dysfibrinogénie congénitale ou CIVD.
PRINCIPE
En présence d’un excès de thrombine, le temps de coagulation d’un plasma préalablement dilué est
inversement proportionnel à la quantité de fibrinogène plasmatique.
COMPOSITION DES REACTIFS
Réactif 1 Thrombine Thrombine bovine
Réactif 2 Diluant Tampon Hepes pH = 7,35
PREPARATION DES REACTIFS
• Reprendre le flacon R1 par le volume d’eau distillée de préférence stérile indiquée sur l’étiquette.
• Laisser la solution se stabiliser 20 min à température ambiante (20-25°C).
PRECAUTIONS
Les réactifs Biomaghreb sont destinés à du personnel qualifié, pour un usage in vitro (ne pas pipeter
avec la bouche).
• Consulter la FDS en vigueur disponible sur demande ou sur www.biomaghreb.com;
• Vérifier l’intégrité des réactifs avant leur utilisation ; et
• Elimination des déchets : respecter la législation en vigueur.
Par mesure de sécurité, traiter tout spécimen ou réactif d’origine biologique comme potentiellement
infectieux. Respecter la législation en vigueur.
PREPARATION DES ECHANTILLONS
• Le sang est prélevé par ponction veineuse franche sur citrate trisodique liquide 0,11 M
(1 volume de citrate pour 9 volumes de sang).
• Centrifuger pendant 10 minutes à 4000 tr/min (2500g) ou laisser sédimenter.
• Réaliser le test de préférence dans les 6h qui suivent le prélèvement.
CONSERVATION ET STABILITE
• Avant ouverture : (Lyophilisé)
entre 2-8°C, jusqu’à la date limite indiquée sur le coffret.
• Après ouverture (Reconstitué) :
8 h à 20 - 25°C ;
48 h à 2 - 8°C ;
1 mois à - 20°C (congeler par petite fraction en tube plastique).
MODE OPERATOIRE
- Diluer le plasma au 1/10 dans le tampon R2. Cette dilution permet d’obtenir habituellement un
temps de coagulation compris entre 8 et 25 secondes. (fibrinémie comprise entre 1,5 et 4 g/l).
- Si le temps de coagulation est inférieur à 8 secondes, répéter le test sur une dilution au 1/20 ou éven-
tuellement au 1/30. Dans ces derniers cas le résultat obtenu sera multiplié par 2 ou 3 respectivement.
- Si le temps est supérieur à 25 secondes, refaire le test sur une dilution au 1/5 ou éventuellement au
1/2. Dans ces derniers cas les résultats obtenus sont divisés par 2 ou 5 respectivement.
1) TECHNIQUE MANUELLE
Dans un tube à hémolyse introduire :
Plasma dilué 200 µl
Maintenir 2 min à 37° C
R1 pré incubé à 37°C 200 µl
- Déclencher simultanément le chronomètre ;
- Plonger régulièrement le crochet au milieu du tube jusqu’à apparition d’un mince filament de fibrine
et noter le temps de coagulation.
2) TECHNIQUE UTILISANT LE FIBROMETRE :
BRAS 0,4 ml
Dans la cuve de l’appareil introduire
Plasma dilué 200 µl
Incuber 2 min à 37°C
R1 non incubé à 37°C 200 µl
Noter le temps de coagulation
3) TECHNIQUE AUTOMATIQUE:
Automate à détection éléctromagnétique
Diluer le plasma dans le tampon R2.
Fibrinémie Dilutions Plasma (ml) Réactif R2
Faible
Normale
Elevée
1: 5
1:10
1: 20
0.1
0.1
0.1
0.4
0.9
1.9
Dans la cuve de l’appareil distribuer :
Plasma dilué 100 µl
incuber 1 min a 37°C
R1 non incubé 50 µl
Noter le temps de coagulation
Faire une double détermination par dosage
4) TECHNIQUE AUTOMATIQUE :
Automate à détection optique
Diluer le plasma dans le tampon R2.
Fibrinemia Dilutions Plasma (ml) Réactif R2
Faible
Normale
Elevée
1:10
1:20
1:40
0.1
0.05
0.05
0.9
0.95
1.95
Dans la cuve de l’appareil distribuer :
Plasma dilué 100 µl
incuber 1 min a 37°C
R1 non incubé 50 µl
Noter le temps de coagulation
Faire une double détermination par dosage
N.B : Pour améliorer la détection optique de la coagulation il faut utiliser le kaolin à 10% (reprendre
le flacon de lyophilisat par 2 ml d’eau distillé (
REF
34014 and(
REF
34038) et ajouter 10 µl de solution
de Kaolin à 10% dans ces flacons : c’est le réactif de travail)
* Le Kaolin est fourni à la demande.
RESULTAT
• Pour chaque temps de coagulation se reporter au tableau joint.
• Dans le kit, la concentration de fibrinogène correspondant au temps de coagulation doit être
corrigée comme suit :
- Hématocrite normal : (50%) multiplier par 1,2 le résultat obtenu sur le tableau pour tenir compte
de la dilution dû à l’anticoagulant liquide ; cette majoration de 20 % est compatible avec la précision
de la méthode.
- Hématocrite anormal : Le taux de fibrinogène est obtenu en multipliant le résultat trouvé sur le
tableau par :
C =
(10-(9 Hte*)
(9-(9 Hte)
*Hte = Hématocrite
MATERIEL COMPLEMENTAIRES
• Equipement de base du laboratoire d’analyses médicales ;
• Analyseur de coagulation automatique ou semi-automatique.
VALEURS USUELLES
• Entre 2,5 et 4 g/l
REFERENCES
• Claussa : Acta Haematol 17,137 (1957) ;
• Caenj. Larrieu M.j. Sammama M. L’expansion scientifique Paris 1975 ;
• Andrew M.et al. Blood 70, 165 (1987).
Fabricant Date de
péremption
Usage “In vitro” Température
de conservation
Référence Produit Consulter la notice Conserver à l’abri
de la lumière
Sufsant
pour < n > essais
Numéro de lot
IVD
