6, Rue Ibn Ennafis - Z.I. Lac 3 Tunisie
Tél. : 71 182 500 - Fax : 71 182 250
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SIGNIFICATION CLINIQUE
Chez l’Homme, 70 % du fer de l’organisme est lié à l’hémoglobine, le reste est fixé à des protéines de
transport telle que la ferritine (ou transferrine), ou stockée dans certains tissus notamment le foie et
la moelle osseuse. Des niveaux faibles en fer sérique peuvent être constatés dans le cas d’une anémie
ferriprive (carence martiale) ou chez les patients atteints d’anémie inflammatoire.
A l’inverse, une surcharge en fer peut apparaître au cours de l’hémochromatose ou lors d’un dys-
fonctionnement hépatique aigu.
PRINCIPE
A pH 4,8 le fer Ferrique (Fe
+++
) est libéré instantanément de la transferrine. L’acide ascorbique le réduit
en fer ferreux (Fe
++
). La ferrozine forme avec le fer ferreux, un complexe coloré soluble, mesurable
de 560 à 580 nm.
La présence de thiourée permet d’éliminer l’interférence des ions cuivreux.
COMPOSITION DES REACTIFS
Réactif 1
Guanidine, HCI
Tampon acétate
4,5 mmol/l
pH 5
Réactif 2 Acide ascorbique 40 mmol/l
Réactif 3 Ferrozine 1 mg/l
Réactif 4 Standard 17,9 µmol/l
PRECAUTIONS
Les réactifs Biomaghreb sont destinés à du personnel qualifié, pour un usage in vitro (ne pas pipeter
avec la bouche).
• Consulter la FDS en vigueur disponible sur demande ou sur www.biomaghreb.com;
• Vérifier l’intégrité des réactifs avant leur utilisation ; et
• Elimination des déchets : respecter la législation en vigueur.
Par mesure de sécurité, traiter tout spécimen ou réactif d’origine biologique comme potentiellement
infectieux. Respecter la législation en vigueur.
PREPARATION DES REACTIFS
Dissoudre le contenu d’une spatule d’acide ascorbique (environ 250 mg) dans 50 ml de réactif 1
(réactif A).
Ajouter 40 µI de ferrozine dans 1 ml de réactif A (réactif B).
Le réactif B est préparé extemporanément.
PREPARATION DES ECHANTILLONS
Sérum, plasma hépariné non hémolysé.
CONSERVATION ET STABILITE
• Avant ouverture : Jusqu’à la date de péremption indiquée sur l’étiquette du coffret à + 4°C.
• Après ouverture :
Les réactifs A et B sont stables : 3 jours à 20 - 25°C ;
2 semaines à 2 - 8°C.
MATERIEL COMPLEMENTAIRES
• Equipement de base du laboratoire d’analyses médicales ;
• Spectrophotomètre ou Analyseur de biochimie clinique.
LIMITES
L’utilisation de matériel en verre nécessite un trempage de plusieurs heures dans de l’acide chlo-
rhydrique 2N, puis un rinçage soigneux à l’eau distillée. Il est donc préférable d’utiliser du matériel
plastique à usage unique.
Les doses élevées d’anticoagulants (Héparine) peuvent provoquer des troubles dans le mélange ré-
actionnel.
CONTROLE DE QUALITE
Programme externe de contrôle de la qualité.
Il est recommandé de contrôler dans les cas suivants:
• Au moins un contrôle par série.
• Changement de flacon de réactif.
• Après opérations de maintenance sur l’analyseur.
Lorsqu’une valeur de contrôle se trouve en dehors des limites de confiance, répéter l’opération en
utilisant le même contrôle.
Utiliser des sérums de contrôle normaux et pathologiques.
CALIBRATION
• Etalon du coffret (Réactif 3)
La fréquence de calibration dépend des performances de l’analyseur et des conditions de conser-
vation du réactif.
Il est recommandé de calibrer à nouveau dans les cas suivants:
1. changement du lot de réactif ;
2. après opérations de maintenance sur l’analyseur ; et
3. les valeurs de contrôle sortent des limites de confiance.
LINEARITE
La réaction est linéaire jusqu’à 1000 µg/dl (179,7 µmol/l).
Au-delà, diluer l’échantillon avec une solution NaCl à 9 g/L et refaire le dosage en tenant compte de
la dilution dans le calcul du résultat. La limite de linéarité dépend du rapport de volume échantillon/
réactif.
MODE OPERATOIRE
Longueur d’onde : 578 nm (530-590).
Température : 20 -25°C.
Cuve : 1 cm d’épaisseur.
Ajuster le zéro du spectrophotomètre par :
• Réactif A pour les Blancs Echantillons ;
• Blanc Réactif pour le standard et les échantillons.
Blanc
Réactif
Standard
Blanc
Echantillon
Echantillon
Eau distillée
R4
Echantillon
Réactif A
Réactif B
200µl
-
-
-
1ml
-
200µl
-
-
1ml
-
-
200µl
1ml
-
-
-
200µl
-
1ml
Mélanger et attendre 10 minutes,
Mesurer les absorbances à 578 nm.
Stabilité de la coloration : 30 minutes.
CALCUL
Fer sérique =
DO. Echantillon - DO. Blanc Echantillon
DO Standard
x
n
n= 1 mg/l;
n = 17, 9 µmol /l.
VALEURS DE REFERENCE
Homme
69 - 158 µg/dl
12.5 - 28.3 µmol/l
Femme
59 - 145 µg/dl
10.7 - 26 µmol/l
REFERENCES
Persijn et al Clin. Chem. Acta 35,91 (1971);
Stoockey L. Anal. Chem. 42,779 (1970);
Williams et al. Clin. Chem. 23,237(1977).
FER FERROZINE
Méthode colorimétrique
Détermination quantitative du fer dans le plasma humain
USAGE IN VITRO
FT Fr 03 Date de MAJ : Janvier 2020 Version B
Fabricant Date de péremption Usage “In vitro” Température Référence Produit Consulter la notice Conserver à l’abri de la lumière Suffisant Numéro de lot
de conservation pour < n > essais
