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Tél. : 71 182 500 - Fax : 71 182 250
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SIGNIFICATION CLINIQUE
La créatine kinase (CK) est une enzyme formée d’iso enzymes d’origine principalement musculaire
(CK-M) et cérébrale (CK-B). La CK existe dans le sérum sous forme dimérique, comme CK-MM,
CK-MB, CK-BB et sous forme de macro enzyme. On observe des valeurs élevées de CK dans les
atteintes du muscle cardiaque et dans les affections du muscle squelettique. La mesure de l’activité
de la CK est effectuée, en particulier conjointement avec la CK-MB, pour le diagnostic et le suivi de
l’infarctus du myocarde.
PRINCIPE
Détermination cinétique de la créatine kinase réactivée par la N-acetylcysteïne selon les réactions
suivantes:
Créatine phosphate + ADP
CK
créatine + ATP
D- Glucose + ATP
HK
D-Glucose- 6 P + ADP
D-Glucose-6-phosphate- NADP
G-6PDH
D-Gluconate-6-P+ NADPH+H
CK = créatine kinase
HK= Hexokinase
G-6-PDH=Glucose-6-phosphate déshydrogénase. L’activité catalytique de la CK est déterminée en
mesurant la vitesse d’apparition du NADPH+H+ à 340 nm.
COMPOSITION DES REACTIFS
Réactif 1
Tampon imidazole Acetate pH: 6.7
Glucose
100mmol/l
20 mmol/l
Réactif 2
Substrat
N-Acetyl cysteine
Créatine phosphate
ADP
AMP
NADP
Diadenosine pentaphosphate
Hexokinase
Glucose-6-phosphate deshydrogenase
20 mmol/l
30 mmol/l
5 mmol/l
5 mmol/l
2 mmol/l
10 µmol/l
2500 Ul/l
1500 Ul/l
PREPARATION DES ECHANTILLONS
Prélevez l’échantillon en utilisant des tubes d’échantillonnage standard.
plasma hépariné, ou EDTA
Stabilité : 7 jours à +4 °C à 8 °C
2 jours à +20°C à 25°C
Centrifuger les échantillons pour contenant le précipité avant de procéder à l’analyse.
PREPARATION ET STABILITÉ DU REACTIF DE TRAVAIL
1) Déclenchement de la réaction par le sérum
Mélanger 4 volumes de R1 avec un volume de R2.
Cette solution est stable : 10 jours à 2 - 8°C
1 jour à 20 - 25°C
Non entamé, et conservé à 2 - 8°C ; le réactif est stable jusqu’à la date de péremption.
2) Déclenchement de la réaction par le substrat (R2)
R1 et R2: Prêts à l’emploi.
Une fois ouvert, et à température du laboratoire ; la stabilité de R1et R2 est de 21 jours.
PRECAUTIONS
Les réactifs Biomaghreb sont destinés à du personnel qualifié, pour un usage in vitro (ne pas
pipeter avec la bouche).
• Consulter la FDS en vigueur disponible sur demande ou sur www.biomaghreb.com;
• Vérifier l’intégrité des réactifs avant leur utilisation ; et
• Elimination des déchets : respecter la législation en vigueur.
Par mesure de sécurité, traiter tout spécimen ou réactif d’origine biologique comme potentiellement
infectieux. Respecter la législation en vigueur.
MATERIEL COMPLEMENTAIRE
- Equipement de base du laboratoire d’analyses médicales ;
- Spectrophotomètre ou Analyseur de biochimie clinique.
LINEARITE
Jusqu’au 900 U/l à 37° C si la ΔDO/min est supérieure à 0,200 (340 ou 334 nm) recommencer la
mesure sur une dilution du sérum dans une solution de chlorure de sodium à 9 g/l. Multiplier le
résultat par le facteur de dilution appliqué.
MODE OPERATOIRE
1) Déclenchement de la réaction par le sérum
Longueur d’onde 340nm. Hg 334 ou Hg 365 nm
Température +25 / +30 / +37°C
cuvette 1 cm de trajet optique
Zéro de l’appareil air ou eau distillée
Macro Semi-Micro Micro
Réactif de travail
2500µl 1000µl 500µl
Échantillon
100µl 40µl 20µl
mélanger et incuber 2 minutes, mesurer la variation de l’absorbance par minutes pendant
1 à 3 min
Calcul
Macro Semi-Micro Micro
340nm ΔA/min.x
4130 4130 4130
Hg 334nm ΔA/min.x
4207 4207 4207
Hg 365nm ΔA/min.x
7429 7429 7429
2) Déclenchement de la réaction par le substrat (R2)
Longueur d’onde 340nm.Hg 334 ou Hg 365 nm
Température +25 / +30 / +37°C
cuvette 1 cm light path
Zéro de l’appareil air ou eau distillée
Macro Semi-Micro Micro
R1
2000µl 800µl 400µl
échantillon
100µl 40µl 20µl
R2
500µl 200µl 100µl
mélanger et incuber 2 minutes, mesurer la variation de l’absorbance par minutes
pendant 1à 3 min.
Calcul
Macro Semi-Micro Micro
340nm ΔA/min.x
4130 4130 4130
Hg 334nm ΔA/min.x
4207 4207 4207
Hg 365nm ΔA/min.x
7429 7429 7429
VALEURS DE REFERENCE
Dans tous les cas, chaque laboratoire doit établir ses propres valeurs de référence.
T °C
25°C 30°C 37°C
Hommes
10-80 U/l 15-130 U/l 25-195 U/l
Femmes
10-70 U/l 15-110 U/l 25-170 U/l
REFERENCES
- Bablok W. et al. A genéral Regression Procedure for Method transformation;
- JClin Chem Clin Biochem 1988 ; 26 : 78-790
- Black H.R. Quallich H gareleck CB. Racial diffrences in serum Creatine kinase levels Am J Med 7986
; 81 : 479-487;
- GLick M.R, Ryder KW, Jackson SA. Graphital Comparisons of Interferences in Clinical Chemistry
Instrumentation Clin Chem 1986 ; 32 ; 470-474 Passing;
- H. Bablok W. A New Biometrical Procedure for Testing the Equality of Measurements from Two
Different Analytical Methods J Clin Chem Clin Biochem 1983; 21: 707-720 ;
- Guder W. G., Narayanan S., Wisser H., Zawta B. List of Analytes Preanalytical Variables, Brochure in
Samples : From The Patient to the Laboratory Darnstadt GIT Veriag 1996.
CREATINE KINASE LS
CK-Nac activé, méthode IFCC
USAGE IN VITRO
FT Fr 09 Date de MAJ : 10/ 2020 Version B
Fabricant Date de
péremption
Usage “In vitro” Température
de conservation
Référence Produit Consulter la notice Conserver à l’abri
de la lumière
Sufsant
pour < n > essais
Numéro de lot
IVD
