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IVD
SIGNIFICATION CLINIQUE
Le cholestérol est une molécule indispensable au bon fonctionnement de l’organisme, qui provient
de l’alimentation ou synthétisée au niveau du foie. C’est une molécule insoluble dans le sang, trans-
portée par des protéines « les lipoprotéines » : les LDL, HDL et les VLDL. Le dosage de la cholestéro-
lémie est effectué dans le but de déceler une hypercholestérolémie, qui pourrait entrainer l’apparition
de plaques d’athérome (l’athérosclérose), et peut servir également pour le diagnostic de pathologies
hépatiques et thyroïdiennes. Dans certains cas, le suivi de la cholestérolémie s’effectue avant d’initier
une thérapie médicamenteuse.
PRINCIPE
Le taux de cholestérol est mesuré après hydrolyse enzymatique puis oxydation. L’indicateur quino-
neimine est formé à partir du peroxyde d’hydrogène et du amino 4 antipyrine en présence de phénol
et de peroxydase selon les réactions suivantes :
Cholestérol estérase
Esters de cholestérol + H
2
O Cholestérol + Acides gras
Cholestérol oxydase
Cholestérol + O
2
Cholestène-4-one-3 + H
2
O
2
Péroxydase
H
2
O
2
+Phénol + Amino-4–antipyrine Quinoneimine rose
La quantité de quinoneimine formée est proportionnelle à la concentration du cholestérol.
COMPOSITION DES REACTIFS
Réactif 1
Solution
tampon
Pipes pH 6.9
Phénol
90 mmol/l
26 mmol/l
Réactif 2
Enzymes
Cholestérol oxydase
Peroxydase
Cholestérol estérase
Amino-4-antipyrine
300 U/l
1250 U/l
300 U/l
0.4 mmol/l
Réactif 3
Standard
Standard Cholestérol
200 mg/dl
2 g/l
5.17 mmol/l
PRECAUTIONS
Les réactifs Biomaghreb sont destinés à du personnel qualifié, pour un usage in vitro (ne pas pipeter
avec la bouche).
• Consulter la FDS en vigueur disponible sur demande ou sur www.biomaghreb.com;
• Vérifier l’intégrité des réactifs avant leur utilisation ; et
• Elimination des déchets : respecter la législation en vigueur.
Par mesure de sécurité, traiter tout spécimen ou réactif d’origine biologique comme potentiellement
infectieux. Respecter la législation en vigueur.
PREPARATION DES REACTIFS
Solution de travail :
Dissoudre le lyophilisat R2 avec le contenu d’un flacon Tampon R1.
PREPARATION DES ECHANTILLONS
Sérum, plasma hépariné non hémolysé.
CONSERVATION ET STABILITE
• Avant ouverture : Jusqu’à la date de péremption indiquée sur l’étiquette du coffret à 2-8°C;
• Après ouverture : (Solution de travail) :
1 mois à 20-25°C;
4 mois à 2-8°C.
MATERIEL COMPLEMENTAIRES
• Equipement de base du laboratoire d’analyses médicales ;
• Spectrophotomètre ou Analyseur de biochimie clinique.
CONTROLE DE QUALITE
Programme externe de contrôle de la qualité.
Il est recommandé de contrôler dans les cas suivants:
• Au moins un contrôle par série;
• Changement de flacon de réactif;
• Après opérations de maintenance sur l’analyseur.
Lorsqu’une valeur de contrôle se trouve en dehors des limites de confiance, répéter l’opération en
utilisant le même contrôle.
Utiliser des sérums de contrôle normaux et pathologiques.
CALIBRATION
Etalon du coffret (Réactif 3) ou tout calibrant raccordé sur une méthode ou un matériau de réfé-
rence.
La fréquence de calibration dépend des performances de l’analyseur et des conditions de conser-
vation du réactif.
Il est recommandé de calibrer à nouveau dans les cas suivants:
1. changement du lot de réactif ;
2. après opérations de maintenance sur l’analyseur ; et
3. les valeurs de contrôle sortent des limites de confiance.
LINEARITE
La méthode est linéaire jusqu’à 6 g/l (600 mg/dl - 15.4 mmol/l). Si la concentration en cholestérol
est supérieure à 6 g/l, diluer l’échantillon au 1/2 avec une solution de NaCl à 9 g/l et refaire le test.
Multiplier le résultat par 2.
MODE OPERATOIRE
Longueur d’onde : 505 nm (500-550) ;
Température : 37°C ;
Cuve : 1 cm d’épaisseur ;
Ajuster le zéro du spectrophotomètre par le Blanc Réactif.
Blanc Standard Echantillon
Standard
- - 10 µl - -
Echantillon
- - - - 10 µl
Solution de travail
1 ml 1 ml 1 ml
Mélanger, lire les absorbances après une incubation de 5 minutes à
37°C ou 10 minutes à 20-25°C. La coloration est stable 30 minutes.
CALCUL
Cholestérol =
DO échtantillon
DO Standard
x n
n = Valeur du standard
n = 200 mg/dl;
n = 2 g/l;
n = 5, 17 mmol/l.
VALEURS DE REFERENCE
Sérum ou
plasma
3,6 à 5,7 mmol/l
1,4 à 2,2 g/l
140 à 220 mg/dl
REFERENCES
Trinder P., Ann. Clin. Biochem. 6, 24 (1969) ;
Richmond, Clin. Chem. 19, 1350 (1973) ;
Fasce C.F., Clin. Chem. 18901 (1982).
CHOLESTEROL
Méthode enzymatique colorimétrique (CHOD- PAP)
Réactif pour le dosage quantitatif du Cholestérol
Total dans le plasma humain
USAGE IN VITRO
FT Fr 22 Date de MAJ : Janvier 2020 Version B
Fabricant Date de
péremption
Usage “In vitro” Température
de conservation
Référence Produit Consulter la notice Conserver à l’abri
de la lumière
Sufsant
pour < n > essais
Numéro de lot
