6, Rue Ibn Ennafis - Z.I. Lac 3 Tunisie
Tél. : 71 182 500 - Fax : 71 182 250
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SIGNIFICATION CLINIQUE
Le calcium est le minéral le plus abondant du corps humain. Dans le sang, le calcium est présent
sous forme non-diffusible et diffusible. Sous la forme non-diffusible, le calcium est lié aux protéines
plasmatiques (principalement l’albumine). Sous sa forme diffusible, 50% du taux sérique est ionisé
et 5% est complexé (citrate, phosphate…).
Une hypercalcémie peut être due à de nombreux désordres, tels que l’hyperparathyroïdisme (souvent
liée à une insuffisance rénale chronique) et les états néoplasiques qui se manifestent par des mé-
tastases ostéolytiques. D’autre part, une hypocalcémie peut être associée à une insuffisance rénale,
l’hypoparathyroidisme et parfois à une carence ou à un défaut de résorption du calcium ou de la
Vitamine D.
PRINCIPE
La mesure du calcium est fondée sur la méthode o-crésolphtaléine complexon (CPC). En milieu
alcalin, le calcium forme avec l’o-crésolphtaléine, un complexe violet, dont l’intensité de la couleur
est directement proportionnelle à la concentration du calcium de l’échantillon testé.
COMPOSITION DES REACTIFS
Réactif 1
Solution
tampon
Tampon Alcalin
2-Amino-2-methyl
1-Propanol
500 mmol/l
Réactif 2
Solution
chromogène
Complexant crésolphtaléine
Hydroxy 8 quinolèine
0.62 mmol/l
69 mmol/l
Réactif 3
Standard
Standard calcium
10 mg/dl
100 mg/l
2.5 mmol/l
PRECAUTIONS
Les réactifs Biomaghreb sont destinés à du personnel qualifié, pour un usage in vitro (ne pas pipeter
avec la bouche).
• Consulter la FDS en vigueur disponible sur demande ou sur www.biomaghreb.com
• Vérifier l’intégrité des réactifs avant leur utilisation.
• Elimination des déchets : respecter la législation en vigueur.
Par mesure de sécurité, traiter tout échantillon ou réactif d’origine biologique comme potentiellement
infectieux. Respecter la législation en vigueur.
PREPARATION DES REACTIFS
Solution de travail :
Mélanger 1 volume du réactif R1 avec 1 volume du réactif R2.
PREPARATION DES ECHANTILLONS
Sérum ou plasma hépariné.
Urine diluée au 1/3 avec de l’eau distillée, acidifiée à pH : 3,4 avec HCI dilué.
CONSERVATION ET STABILITE
• Avant ouverture : Jusqu’à la date de péremption indiquée sur l’étiquette du coffret à +4°C.
• Après ouverture (Solution de travail) :
4 heures à 20 -25°C ;
20 heures à 2-8°C.
MATERIEL COMPLEMENTAIRES
• Equipement de base du laboratoire d’analyses médicales ;
• Spectrophotomètre ou Analyseur de biochimie clinique.
LIMITES
Utiliser du matériel plastique à usage unique pour toutes les manipulations. La présence dans cer-
tains détergents de chélateurs tel que l’EDTA peut empêcher dans certains cas la formation du com-
plexe coloré.
CONTROLE DE QUALITE
Programme externe de contrôle de la qualité.
Il est recommandé de contrôler dans les cas suivants:
• Au moins un contrôle par série ;
• Changement de flacon de réactif ;
• Après opérations de maintenance sur l’analyseur.
Lorsqu’une valeur de contrôle se trouve en dehors des limites de confiance, répéter l’opération en
utilisant le même contrôle.
Utiliser des sérums de contrôle normaux et pathologiques.
CALIBRATION
Etalon du coffret (Réactif 3) ou tout calibrant raccordé sur une méthode ou un matériau de réfé-
rence.
La fréquence de calibration dépend des performances de l’analyseur et des conditions de conser-
vation du réactif.
Il est recommandé de calibrer à nouveau dans les cas suivants:
1. changement du lot de réactif ;
2. après opérations de maintenance sur l’analyseur ; et
3. les valeurs de contrôle sortent des limites de confiance.
LINEARITE
La méthode est linéaire jusqu’à 150 mg/l (3,75 mmol/l).
Si la concentration est élevée, diluer l’échantillon au 1/2 par du NaCI à 9 g/l. Multiplier le résultat
par 2.
MODE OPERATOIRE
Longueur d’onde : 570 nm (550-590) ;
Température : 20 -25°C ;
Cuve : 1 cm d’épaisseur ;
Ajuster le zéro du spectrophotomètre sur le blanc réactif.
Blanc Standard Echantillon
Standard
- - 20 µl - -
Echantillon
- - - - 20 µl
Solution de travail
1 ml 1 ml 1 ml
Mélanger et incuber 5 minutes à température ambiante.
Lire les densités optiques. La coloration est stable 1 heure.
CALCUL
Calcium =
DO échtantillon
DO Standard
n = Valeur du standard
n =100 mg/l;
n =10 mg/dl;
n =2,5 mmol/l.
VALEURS DE REFERENCE
Sérum
Nouveau-nés
7.5 - 12 mg/dl
1.87 - 3 mmol/l
Enfants
10 -11 mg/dl
2.50 - 2.74 mmol/l
Adultes
9.0 - 10.6 mg/dl
2.25 - 2.65 mmol/l
Urine
Nouveau-nés
1 - 8 mg/kg/24h
0.025 - 0.2 mmol/kg/24h
Enfants
2 - 6 mg/kg/24h 2.50
0.05 - 0.150 mmol/kg/24h
Adultes
150 - 300 mg/24h
3.75 - 7.5 mmol/24h
REFERENCES
Stern J., Lewis W.H.P., Clin. Chim. Acta 2, 576 (1957)
CALCIUM
Méthode colorimétrique
Réactif pour le dosage quantitatif du calcium total
dans le plasma humain et les urines
USAGE IN VITRO
FT Fr 01 Date de MAJ : Janvier 2020 Version B
Fabricant Date de péremption Usage “In vitro” Température Référence Produit Consulter la notice Conserver à l’abri de la lumière Suffisant Numéro de lot
de conservation pour < n > essais
