6, Rue Ibn Ennafis - Z.I. Lac 3 Tunisie
Tél. : 71 182 500 - Fax : 71 182 250
www.biomaghreb.com
IVD
SIGNIFICATION CLINIQUE
Les α-amylases sont des enzymes hydrolytiques qui scindent l’amidon en maltose. Dans le corps
humain, les amylases trouvent leur origine dans des différents organes : l’amylase pancréatique
est produite par le pancréas et libérée dans le tractus intestinal, l’amylase salivaire est synthétisée
dans les glandes salivaires et sécrétée dans la salive. L’amylase présente dans le sang est éliminée
par le rein et excrétée dans l’urine ; l’élévation de l’activité sérique d’amylase se reflète ainsi dans
l’augmentation de l’activité de l’amylase urinaire. La mesure de l’amylase dans le sérum et l’urine
s’applique principalement au diagnostic d’affections pancréatiques et au dépistage de l’apparition
de complications.
PRINCIPE
Détermination cinétique en colorimétrie de l’activité α–amylase du sérum, plasma ou urine selon la
réaction :
5 CNPG
3
α–amylase
3 CNP + 2 CNPG
2
+ 2 G
3
+ 2 Glucose
L’α–amylase hydrolyse le 2-chloro-4-nitrophenyl-α–D- maltotrioside (CNPG
3
) pour libérer le 2-chlo-
ronitrophenol et former le 2-chloro-4- nitrolphenyl-α–D-maltoside (CNPG
2
), le maltriose (G
3
) et le
glucose (G). La vitesse de formation du 2-chloro-nitrophenol mesurée par la variation de la densité
optique à 405 nm par minute est proportionnelle à l’activité α–amylase dans l’échantillon.
COMPOSITION DES REACTIFS
Réactif CNPG
3
prêt à l’emploi renferme:
2-chloro-4-nitrophenyl-α–D-
maltotrioside (CNPG
3
) 2.5 mmol/l
Tampon MES pH = 6 50 mmol/l
NaCl 250 mmol/l
Ca (CH3 COO)
2
4.5 mmol/l
KSCN 375 mmol/l
Azide de Sodium 152 mmol/l
PREPARATION DES REACTIFS
- Le réactif fourni est prêt à l’emploi.
- Ne pas utiliser le réactif si la DO du blanc réactif est supérieure à 0.500 à 405 nm
PRECAUTIONS
Les réactifs Biomaghreb sont destinés à du personnel qualifié, pour un usage in vitro (ne pas pipeter
avec la bouche).
• Consulter la FDS en vigueur disponible sur demande ou sur www.biomaghreb.com;
• Vérifier l’intégrité des réactifs avant leur utilisation ; et
• Elimination des déchets : respecter la législation en vigueur.
Par mesure de sécurité, traiter tout spécimen ou réactif d’origine biologique comme potentiellement
infectieux. Respecter la législation en vigueur.
PREPARATION DES ECHANTILLONS
• Sérum ou plasma recueilli sur héparine ou iodo-acétate (EDTA ou citrate ne doivent pas
être utilisés).
• Hémolyse génante
• Urine
REMARQUES
Le réactif doit être conservé entre 15° - 25°C avant son utilisation.
NE PAS PIPETER PAR LA BOUCHE afin d’éviter la contamination par l’amylase salivaire.
CONSERVATION ET STABILITE
• Le réactif est stable à 2-8° jusqu’à la date d’expiration, et il est stable 30 jours à tempéra-
ture (20-25°C).
MATERIEL COMPLEMENTAIRES
• Equipement de base du laboratoire d’analyses médicales ;
• Spectrophotomètre ou Analyseur de biochimie clinique.
LINEARITE
• La réaction est linéaire jusqu’à 2000 U/L.
• Si la ΔDO par min est > 0.630 refaire la détermination en diluant l’échantillon au 1/10 avec
NaCl 0.9 g/l.
MODE OPERATOIRE
Longueur d’onde…………………………………….405 nm
Température……………………………………………37°C
Cuve………………………………………….1 cm épaisseur
Ajuster le Zéro du spectrophotomètre sur l’air ou l’eau distillée.
Dans un tube introduire
• Réactif α–amylase 1000 µl
Equilibrer à 37°C
• Echantillon Sérum 25 µl ou Urine 10 µl
Mélanger, attendre 1 minute. Mesurer l’augmentation moyenne de
DO par minute pendant 1 à 3 min.
CALCUL
α–amylase (U/L) Sérum = ΔD.O / min / x 3178
α–amylase (U/L) Urine = ΔD.O / min / x 7829
VALEURS DE REFERENCE
37°C
Sérum, plasma < 100 U/l
Urine < 380 U/l
REFERENCES
- Kaufman RA. Tietz NW-Clin Chem.26: 8461 (1980) ;
- Ranson JHC.Curr Prob Surg, 16:1 ( 1979) ;
- Young DS. et al, v. clin chem, 21 (1975).
ALPHA AMYLASE
Détermination Cinétique Colorimétrique Directe CNPG
3
USAGE IN VITRO
FT Fr 08 Date de MAJ : 10/ 2020 Version B
Fabricant Date de
péremption
Usage “In vitro” Température
de conservation
Référence Produit Consulter la notice Conserver à l’abri
de la lumière
Sufsant
pour < n > essais
Numéro de lot
